如何调内参❓➡️两种方法，水灵灵的就调齐了
下辈子做只猪
2025-11-30 00:34:29
两三年没有测过BCA了[doge]
内参要么第一次跑就是齐的，要么跑一次调后也是齐的，分享下调内参的两种方法！[棒R]
1、ImageJ测灰度值调内参
先跑一次电泳得到初始条带，把条带导入ImageJ计算灰度值，以最大灰度值为基准（最小灰度值也可以），算出倍数，然后用初始上样量✖️倍数就行，详细计算方法在P2和P3～
2、细胞计数法调内参
不用跑电泳，收细胞时根据细胞量加裂解液，可达到内参齐！
➡️若处理条件不会明显影响细胞增殖or死亡，那收细胞时加等量裂解液即可，基本内参就是齐的
➡️若处理条件明显抑制或促进细胞增殖，或诱导细胞死亡，那收细胞之前可以给每个孔的细胞计数，然后根据细胞量加不同的裂解液，这样做出来内参基本也是齐的～计算方法看P5
内参齐后就可以看目的蛋白趋势啦～图上做的指标为BAX，趋势很明显🤣用的Abmart家的一抗试用跑出来的！
🌟背景干净，信号也强
🌟Abmart关于细胞自噬，凋亡，焦亡，线粒体，标签等等一抗都有试用，简直就是我们科研人的福音啊啊啊😇
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